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[接上页] e.用新的福尔马林生理盐水更换旧的固定液,密封在塑料桶中,桶外贴上桶中所有牛脑的编号,以便我们处理牛脑时不开桶盖便可知桶中的牛脑情况。每个塑料桶可根据大小放置相应数量的牛脑。 (ii)采样勺采集法 a.准备专用的采样勺(一把或二把便可)、医用剪刀(一把)、一次性手套、橡胶检查手套(即乳胶手套)以及其他采样用品如采样单等。 b.戴好一次性手套和橡胶检查手套,专门登记的人员不需要戴手套。通过观察牙齿检查牛的年龄。 c.在平整地面倒置牛头,即牛头的两角和鼻子靠地放置。 d.在枕骨大孔处用剪刀剪开脑硬膜,目的是便于插入采样勺。然后用一个食指伸入枕骨大孔中,沿着延脑转一周,目的是切断延脑与头骨之间相连的神经和血管,以便于延脑取出。 e.从延脑腹侧(也即勺子从枕骨大孔的上面进入)将采样勺插入枕骨大孔中,插入时采样勺要紧贴枕骨大孔的腔壁,以避免损坏延脑组织。采样勺插入的深度约为5-7cm(采羊脑时插入深度约为4 cm),然后向上一扳勺子手柄,同时往外抠出脑组织和勺子,延脑便可完整取出。 f.其余步骤见(i)中的d和e。 注:对于临床疑似牛羊,采下脑后,从脑中线一分为二,一份用于甲醛固定,另一份用于-20℃冷冻并在低温下运送至参考实验室。 3.样品的包装与运送 a.单独将采样单邮寄给检测实验室,切不可与样品一起邮寄,目的是防止采样单被污染。 b.将固定好的牛脑放在几个大的带内盖的塑料桶中密封,注意每个牛脑都随身带有一个唯一的编号,桶外壁上也标明桶内的所有牛脑编号。运送时桶里的固定液可以不按10-20倍体积的量,而保留适当的量便可,适当的量是以浸没牛脑为准,不过运送时必须更换成新的固定液。 c.运输时,将装有样品的塑料桶用木架子固定好,以防运输途中颠倒。 d.在木架子外面加两张不干胶标签,一张注明样品名称、采样单位与地址及联系电话,另一张注明放置方向、小心、易碎和切勿倒置等字样。 e.样品由专人或经航空运至检测实验室。 羊痒病监测计划 一、监测范围 重点对规模羊群、种羊养殖场以及屠宰场进行采样监测,采集对象主要为瘙痒、神经症状、共济失调、倒地不起、失明、死亡或其他症状的18月龄以上绵羊和山羊。 二、监测时间 全年送样。瘙痒、神经症状、共济失调羊的样品随时送检。 三、检测机构及所负责省市 (一) 国家牛海绵状脑病参考实验室 中国动物卫生与流行病学中心国家牛海绵状脑病参考实验室负责新疆、青海、甘肃、西藏、四川、陕西、山西、宁夏、河南、河北、天津、安徽、湖北、湖南、山东、江苏、浙江、上海、福建、广东、广西、贵州、重庆、江西、海南、云南等26个省份和新疆兵团的羊痒病样品检测,并负责全国痒病的确诊。 联系人:刘雨田 13455201316 王志亮 13953288519 地址:山东省青岛市南京路369号 电话:0532-87839188 传真:0532-87839922 邮编:266032 电子邮箱:ndlyt1976@yahoo.com.cn(刘雨田) (二)中国农业大学牛海绵状脑病检测实验室 中国农业大学牛海绵状脑病检测实验室负责北京、内蒙、辽宁、黑龙江、吉林等5个省份的羊痒病样品检测。 联系人:杨利峰 13811990965 赵德明 地址:北京市海淀区圆明园西路2号 电话:010-62732975传真:010-62732975 邮编:100094 电子邮箱:yanglf@cau.edu.cn(杨利峰) 四、监测数量 (一)临床监测 各省对辖区内的所有羊群,尤其是种羊群以及从国外进口的羊只进行临床监测,并填写临床监测登记表(见附录2)。临床监测频率为1年两次,相隔时间为4个月。 (二)采样监测 临床监测发现瘙痒、神经症状、共济失调的羊应及时采样送检,若发现与痒病症状相似的病羊(见附录1)可立即与国家牛海绵状脑病参考实验室联系。具体采样数量见表1。 采样时,应填写采样单(见附录3),要求每个样品均有详细的信息。采样方法和步骤同牛海绵状脑病监测采样送样方案。 表1 2011年各省份应采集的羊脑数量
*表示采样的同时要填写采样单,且每份样品均应有详细的信息。 五、检测方法 免疫组织化学方法、酶联免疫吸附(elisa)方法、免疫印迹方法和组织病理学方法,其中elisa方法为筛检方法,免疫组织化学方法和免疫印迹方法为确诊方法,组织病理学方法为辅助诊断方法。 |